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IdeS protease
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QIP-001-A
5000U
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QIP-001-B
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QIP-001-C
1000U
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产品概述

      IdeS仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG以产生F(ab')2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。Rhinogen® IdeS protease是利用E.coli系统重组表达生产,并经过分子改造得到的重组IdeS蛋白。其含有His标签,在酶切完成后很容易从酶切反应体系中分离去除。IdeS蛋白酶在生理条件下切割IgG,从而保持免疫反应性。在pH 6.0~8.0范围的常用缓冲液中,IdeS蛋白酶可有效切割多种抗体。经过改造后的IdeS蛋白酶具有更高的酶活和更广的底物特异性,除可酶切人IgG1~4、猴、羊、兔IgG外,还对小鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性。

 

包装规格:

       Rhinogen® IdeS protease包装规格如下:

目录号

规格

QIP-001-A

5000U

QIP-001-B

5×5000U

QIP-001-C

1000U

      QIP-001是冻干粉制剂产品,制剂缓冲液为20mM Tris50mM NaCl1mM EDTApH 7.5

产品来源:

      Rhinogen® IdeS protease是利E. coli表达系统重组表达生产并经过分子改造得到的重组IdeS蛋白酶,分子量大小约为36kDa


产品质量:

      SDS-PAGE分析,纯度≥95%。

 

产品特性:

      最适pH为6.0~8.0。

 

酶活定义:

      1个酶活力单位定义:37°C条件下,30分钟内酶切1μg重组单克隆IgG所需要的酶量。


储存条件:

      采用冰袋或干冰运输, 收到产品后请立即将其置于-30℃至 -10℃冻存;使用前,用无菌水溶解IdeS protease冻干粉末。溶解后,2~8℃存放,若无菌取用,有效期为30天。

 

产品特点:

      Rhinogen® IdeS protease是一种高度纯化和非常稳定的重组蛋白酶,具有稳定性高、比活性高等特点。适用于重组抗体药物的结构表征分析。

√  高比活性有效切割抗体下铰链,获得F(ab’)2Fc片段;

√  广泛的底物特异性:除对人IgG1~4、猴、羊、兔IgG有酶切活力外,还对小鼠IgG2aIgG3具有特异性切割活性;

√  无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料;

√  高稳定性:每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性。

 

应用:

      特定位点裂解IgG以产生F(ab’)2Fc片段。


使用建议:

试剂准备:

  1. 使用前,请将Rhinogen® IdeS protease取出,10000rpm离心10秒,确保所有干粉都在管底;
  2. 用去离子水将Rhinogen® IdeS protease干粉溶解成50units/μl溶液。

推荐使用方法:

1)在消化缓冲液或其他相容缓冲液中加入所需量的IgG0.5~10mg/ml);

2)Rhinogen® IdeS protease加入至IgG样品中;

  • 每1μg IgG加1 unit IdeS蛋白酶进行消化;例如,加入1μl50 unitsIdeS溶液以消化50μg的IgG;

3)37条件下孵育30~60分钟。


操作说明:

      Rhinogen® IdeS protease能有效地切割人类,人源化,嵌合,羊,兔和猴IgG,并对小鼠IgG2aIgG3具有较高活性。Rhinogen® IdeS protease也能切割许多Fc-融合蛋白以及抗体药物偶联物(antibody drug conjugates ,ADCs);

  • IdeS protease不能切割小鼠IgG1 / IgG2b,大鼠,猪,牛或山羊IgG。此外,它不能切割非IgG同种型,包括IgAIgMIgD和IgE;
  • 理想的IgG浓度应在0.5~10mg/ml的范围内;
  • 酶切反应缓冲液pH为6.0~8.0,最适pH6.5,且NaCl浓度不宜过高,建议消化缓冲液为10mM sodium phosphate10mM NaCl,pH6.5;
  • 对于小鼠IgG2a和小鼠IgG3的切割,增加IdeS蛋白酶的量(建议5倍至10倍作为起点)和孵育时间(2小时至过夜);
  • 通过SDS-PAGE很容易确定IgG的切割;
  • IdeS protease具有组氨酸标签,便于从酶切反应体系中去除;
  • 将消化产物与Protein A珠孵育30~60分钟后,可以获得纯化的F(ab’)2片段;
  • 本产品仅供研究使用,不适用于人或动物的诊断及治疗用途。


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常见问题

若需要其它包装规格,是否可以接受定制?
可以。若需GMP条件下生产且可应用于临床试验的药用级大包装,请咨询客服电话0512-87663137,手机 13913106535(王经理),或发送电子邮件至techserv@rhinobio.com。
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