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Immobolized IdeS Cut-Pure Kit,Microspin
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QIP-102-A
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产品概述

背景:来自Streptococcus pyogenes的 IdeS protease是仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG以产生F(ab')2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。由于IdeS protease在一个特定位点消化IgG,因此延长孵育时间也没有过度消化的风险。

       Rhinogen® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit,Microspin包含用于抗体消化的Immobilized IdeS,Microspin和用于F(ab')2片段以及Fc片段分离的Protein A纯化柱。
       Rhinogen® Immobilized IdeS,Microspin使用经过改造后的IdeS蛋白酶,因此具有更广的底物特异性,可有效切割人IgG1~4(切割位点如下表1)、猴、羊、兔的IgG,还可特异性切割小鼠IgG2a、IgG3。此外,Immobilized IdeS,Microspin 可在生理条件下切割IgG,从而保持酶切产物的免疫原性。
       Protein A纯化柱采用了重组表达的Protein A,与天然Protein A相比,增强了与Fc结合的专一性,同时提高了蛋白稳定性。Protein A纯化柱能够特异性地结合多种免疫球蛋白的Fc区段。

包装规格:

  Rhinogen® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit,Microspin包装规格如下:

                  目录号
        规格
               QIP-102-A
         1Kit
               QIP-102-B
         5Kit
               QIP-102-C
        10Kit
一套Immobilized IdeS,Microspin及Protein A纯化柱可组合用于0.5mg IgG的酶切及纯化。

产品储存于20%乙醇中,不添加防腐剂。

储存条件:采用冰袋运输,Immobilized IdeS,Microspin及Protein A 纯化柱产品均储存于20%乙醇中,收到产品后请立即将其置于2-8℃保存。避免冻存!

产品特点:

      Rhinogen®  Immobolized IdeS Cut-Pure Kit,Microspin具有如下特性:

√  比活性高:有效切割抗体下铰链,获得F(ab’)2和Fc片段;酶切效率≥90%;

√  底物特异性广:能有效切割人IgG1~4、猴、羊、兔IgG、小鼠IgG2a、IgG3;

√  回收率高:经消化后,纯化分离可收获F(ab')2,回收率>80%以上;

√  稳定性高每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性。 

应用:重组抗体药物的结构表征分析, Fab片段的制备。

操作说明:

1. Rhinogen® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit,Microspin能有效地用于酶切及纯化人类、人源化、嵌合、羊、兔和猴的IgG,并对小鼠IgG2a和IgG3也具有中等活性,同时也适用于许多Fc-融合蛋白以及抗体药物缀合物(antibody drug conjugates,ADCs)的酶切及纯化。不适用于小鼠IgG1/IgG2b、大鼠、猪、牛或山羊IgG。此外,它不能切割非IgG同种型,包括IgA、IgM、IgD和IgE;
2. 对于小鼠IgG2a和小鼠IgG3的切割,建议适度提高孵育温度(酶切温度越接近37℃,则酶活越高)及孵育时间(2小时至过夜);
3. 理想的IgG浓度应在0.5~20mg/ml的范围内;
4. 通过SDS-PAGE很容易确定目标蛋白的切割;
5. 最适的酶切反应缓冲液pH为6.0~8.0,在低于pH5.0体系中,Immobolized IdeS会不可逆的失活,在高于pH8.0体系中需要适当延长/优化反应条件;
6. 本产品仅供研究使用,不适用于人或动的物诊断及治疗用途。

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