背景:
岩藻糖是许多寡糖(O或N-连)和多糖结构以及糖蛋白和糖脂的重要组成部分,它们通常与各种生物事件有关,包括受精、胚胎发生、细胞凋亡、信号转导和疾病进展,如类风湿性关节炎、炎症、癌症及囊性纤维化。糖缀合物的去岩藻糖基化是了解糖缀合物生物学效应的重要过程。
概述:
Rhinogen® α1-2,4,6Fucosidase是利用大肠杆菌系统表达并经过多步层析纯化得到的重组糖苷酶,分子量大小约为91.5kDa。为方便与其他糖苷酶联用,Rhinogen® α1-2,4,6Fucosidase 的酶活定义是在37℃反应时计算的。但该酶的最佳反应温度为50℃。37°
C 时会导致约35%的活性降低。
图1 底物特异性
包装规格:
Rhinogen ®α1-2,4,6 Fucosidase(α1-2,4,6岩藻糖苷酶)包装规格如下:
目录号 |
规格 |
浓度 |
QPF-014-A |
100U |
2000U/ml |
产品储存于50mM NaCl,20 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH7.5中,不添加防腐剂。
配套试剂:
Rhinogen® α1-2,4,6 Fucosidase配套提供的试剂如下:
目录号 |
试剂 |
成分 |
EB04 |
10×Glyco 缓冲液1 |
50 mM CaCl2, 500 mM sodium acetate, pH 5.5 |
产品来源:
重组表达于E. coli,理论分子量约91.5KD,N端有MBP融合蛋白,C 端带6×His标签。
产品质量:
SDS-PAGE分析,纯度≥95%;没有检测到污染的外切糖苷酶、糖苷内切酶及蛋白酶活性。
产品特性:
热失活条件:65°C处理10 min
酶活定义:
一个酶活单位定义为:在37°C 下反应1 小时,总反应体积为10μl 时,从人IgG[GlcNAcβ1-2Manα1-6(GlcNAcβ1-2Manα1-3)Manβ1-4GlcNAcβ1-4GlcNAc(Fucα1-6)-AMAC]的1 nmol G0F 中切割> 95% 的岩藻糖所需的酶量。
保藏条件:
1. 采用冰袋运输, 收到产品后请立即将酶置于2-8℃;配套试剂置于-20℃储存。
特性:
Rhinogen ® α1-2,4,6 Fucosidase是一种广泛特异性的外切糖苷酶,可催化寡糖中α1-2、α1-4和α1-6末端岩藻糖残基的水解,而且与其他键相比,可以更有效地切割α1-6岩藻糖残基。
1. 高纯度:没有污染蛋白酶/其它糖苷酶,纯度≥95%;
2. 高稳定性:每批产品都经过严格的质量控制,呈现高稳定性;
3. 与下游 HPLC、质谱兼容:不含甘油,酶切体系与 HPLC 及质谱工作流程环境兼容。应用:
1. 聚糖结构分析;
2. 治疗性重组蛋白的表征及质量控制;