糖基化是细胞外蛋白质组的基本特征,糖蛋白质组学分析方法也在不断更新并取得了显著成果。相比于N-糖结构,O-糖链空间结构更加复杂,因此还没有一种酶能完整释放整个O-糖链,导致O-糖基化的表征较为困难。
为缓解现阶段O-糖基化表征困难的问题,O-糖蛋白酶应运而生。O-糖蛋白酶是一组种类不断增加的高度特异性的酶,可识别并切割糖肽/糖蛋白上,与 O-糖基化丝氨酸或苏氨酸相邻的位置。对 O-糖蛋白酶酶切产生的糖肽进行 MS 分析,可提供有关蛋白序列中 O-糖基化位点和每个糖基化位点上连接的 O-糖链结构的重要信息。
·产品介绍·
Rhinogen® O-GlyCORTAR protease源自于Pseudomonas aeruginosa,在大肠杆菌中重组表达,含有His标签,理论分子量约为97kDa。
Rhinogen® O-GlyCORTAR protease是一种O-聚糖依赖性蛋白酶,可消化携带粘蛋白型O-聚糖的蛋白质,其酶切位点为糖基化 Ser和Thr残基的N末端。该酶不会消化未修饰的丝氨酸或苏氨酸残基,也不会消化糖蛋白的 N-糖基化位点;并且对多种 O-聚糖结构具有活性,包括唾液酸化的糖基化核心1和核心2结构以及Tn抗原。
O-GlyCORTAR protease(货号:QIP-013)对不同的O-聚糖结构表现出更广泛的活性,包括唾液酸化底物,然而对具有两个相邻O-糖基化Ser/Thr残基位点的活性有限。O-Glycoprotease(货号:QIP-008)显示出更高的O-聚糖位点覆盖率,但需要去除唾液酸以提高酶活性。
因此,如需了解糖蛋白底物中O-聚糖位点的完整信息(包含多个具有两个相邻O-糖基化Ser/Thr残基的位点),O-Glycoprotease更加适用;而想要保留糖蛋白底物唾液酸化的信息,推荐使用O-GlyCORTAR protease。总而言之,O-GlyCORTAR protease和O-Glycoprotease可互补提供有关聚糖组成和O-聚糖位点的完整信息。
Rhinogen® O-GlyCORTAR protease包装规格如下:
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