背景:

       报告基因检测是基因表达调节研究的重要手段，目前已被广泛应用于分子生物学及细胞生物学研究领域。报告基因检测法是一种将转录调控和报告基因（如荧光素酶）偶联表达，通过报告基因表达产物（如荧光素酶）活性的测定判断细胞刺激物（如小分子化合物、重组蛋白）生物学活性的方法。《中国药典》2015 年版已将报告基因检测方法列为干扰素活性测定法第二法（通则 3523）。目前在生物制品 PD1/PD-L1、IL6/IL6R 等相关单抗药物的生物学活性检测和 Fc 效应功能研究中，报告基因检测法已经起到了至关重要的作用。以往只能采用体内动物学活性研究的细胞因子如 EPO、GH、FSH、TSH 等，也在逐步采取体外报告基因检测法替代原有的动物体内法作为产品批放行的关键指标。转录调节与报告基因的表达相结合通常用于广泛的生理学研究，例如通过量化特定受体反应元件对基因表达的作用来分析受体功能，或者用来进行信号转导、转录因子、蛋白质与蛋白质相互作用和病毒感染和传播的研究，转录下游的事件，如 mRNA 加工和蛋白质折叠，也可以被分析。因此，荧光素酶被广泛应用于生物技术和制药行业。

概述:

        萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）是一种分子量为 61kDa 的蛋白，因其在宿主细胞中无背景萤光，同时无需翻译后修饰，检测快速、可靠和方便，是应用萤火虫荧光素酶报告基因系统检测的理想选择。本试剂盒以 D-荧光素（D-luciferin）为底物，在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以被萤火虫荧光素酶催化进行氧化脱羧反应，产生激活态的氧化荧光素（Oxyluciferin），并产生生物萤光（Bioluminescence）（图 1）。生物萤光与与荧光素酶的启动子活性成比例，间接反映了细胞刺激物的生物学活性。

 图1. 萤火虫荧光素酶底物的发光原理

产品规格：

          本试剂盒包装规格如下表：

产品特性: 

       Bio-One™ One-Step 萤火虫荧光素酶分析试剂盒具有操作简便、试剂稳定、一致性良好、灵敏度高等特点。

       1. 方便：将冻干粉底物与缓冲液简单混合即可使用，样品检测步骤简单；

       2. 快速：荧光素酶检测 5-30min 内完成；

       3. 更亮更持久的光信号：针对批处理和持续测量进行了优化，延长的强光输出时间有助于增加灵敏度，尤其是延长孵化时间的实验；

       4. 高灵敏度：能够检测最低 10-20mol 的荧光素酶； 

 存储：

        采用冰袋运输。收到试剂盒后，可在-30 ~ -15℃长期保存，混合后的试剂反复冻融 11 个循环仍可保持稳定。

        1. 混合前：Bio-One™ One-Step 荧光素酶反应缓冲液可在室温保存 90 天(> 90%活性)或在 2 ~ 8℃长期保存； 

        2. 混合后：Bio-One™ One-Step 荧光素酶分析试剂可在室温保存 1 天(> 80%活性)或在 2 ~ 8℃保存 5 天(> 85%活性)。为保证试剂出色的使用性能，未使用完的试剂建议-70℃保存

        低于-10℃避光保存。为保证最佳使用性能，长期存储时，建议置于-70℃保存。